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禽波氏桿菌PCR試劑盒的操作方法分享
點(diǎn)擊次數(shù):516 更新時(shí)間:2023-06-06
  PCR技術(shù)(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是基于DNA可逆性復(fù)制過程的分子生物學(xué)技術(shù),該技術(shù)以放大DNA作為檢測(cè)某類特定微生物、基因或設(shè)置一類基因突變的手段而廣泛使用。需要儀器設(shè)備和試劑盒等工具來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作?,F(xiàn)本文簡(jiǎn)單介紹如何操作禽波氏桿菌PCR試劑盒
 

 

  步驟1:實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
 
  在進(jìn)行試驗(yàn)前,請(qǐng)從-20℃保存禽波氏桿菌PCR試劑盒的內(nèi)容物,冰凍在保險(xiǎn)柜中長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月或更久。嚴(yán)格損壞或超期的物品不要使用。將PCR換??nuclease-free水解凍,并遵循此后面指導(dǎo)的操作提示。
 
  步驟2:混和PCR反應(yīng)液
 
  干燥PCR溶液A+B混合物重,加入dH_2O100μL(每個(gè)樣本)。從原始DNA樣本中提取1μL并將其添加到管中。每個(gè)標(biāo)記使用完整盒子中的所有通量級(jí)別以確保溶液替代物可以容納一個(gè)確信區(qū)域。pipette上演沸騰30秒(龍頭混合澄清),離心10秒,并放入熱循環(huán)器中。
 
  步驟3:樣品擴(kuò)增
 
  進(jìn)入熱循環(huán)過程,程序?yàn)椋?5秒95℃→30秒57℃→30秒72℃)×35次和10分鐘72℃。放置PCR產(chǎn)品在冰上。
 
  步驟4:電泳檢測(cè)
 
  從PCR反應(yīng)管的每個(gè)標(biāo)簽中移動(dòng)5μLPCR擴(kuò)增產(chǎn)物,并將其滴到薄板或管中。然后使用1-2%瓊脂糖/TAE凝膠進(jìn)行電泳處理。用溴化乙錠染色,并通過UV燈檢查這些凝膠片。根據(jù)需要確定擴(kuò)增產(chǎn)物的大小。
 
  總之,在使用禽波氏桿菌PCR試劑盒時(shí),需要了解其所采用的PCR技術(shù)并仔細(xì)閱讀說明書,并在實(shí)驗(yàn)室條件下非常謹(jǐn)慎地操作。
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