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總黃酮(TF)試劑盒說明書

簡要描述:

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更新時間:2022-01-27

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總黃酮(TF)試劑盒說明書

產品簡介:

產品名稱:總黃酮(TF)試劑盒說明書

規(guī)格:48樣 96樣

貨號:AS020

檢測方法:可見分光光度法 微板法

產品分類:氧化應激系列

貯存溫度:2~8℃。

本試劑盒保質期:6個月。本產品僅用于科研實驗。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。23.png

 

所需的儀器和用品:

 

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

① 組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

Glucagon  抗體 規(guī)格: 0.1ml

PGF2 α  前列F2a抗體 規(guī)格: 0.2mlalpha 2 Macroglobulin  α2巨球(α-2M)抗體 規(guī)格: 0.2ml

IL-6R Beta/CD130/gp130  白細胞介6受體β抗體IL-6Rβ 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml

phospho-MEF2D(Ser444)  磷化肌細胞特異性增強因子2D抗體 規(guī)格: 0.1ml

MAP1A  微管相關1A抗體 規(guī)格: 0.1ml

Vitamin D Binding protein  D結合抗體 規(guī)格: 0.2ml

E-cadherin/CD324  上皮鈣粘附分子抗體 規(guī)格: 0.1ml

CDC42  細胞分化周期CDC42抗體 規(guī)格: 0.1ml

CGR19  細胞生調控19抗體(環(huán)指197) 規(guī)格: 0.2ml

PCDHA3  原鈣粘附α3抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-human IgG/HRP  辣根過氧化物標記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

總黃酮(TF)試劑盒說明書3934-84-73-O-甲基沒食子 規(guī)格: 20mg

泛影 規(guī)格: 100mg

20736-09-8柴胡皂a 規(guī)格: 20mg

464-92-6積雪草 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial

470-17-7異土木香內酯 規(guī)格: 20mg

腐胺 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

千里光對照藥材 規(guī)格: 1g

153719-23-4噻嗪;純品型;標準品;有證書 規(guī)格: 0.1g

4684-32-6鴨腳樹葉 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

枇杷葉 規(guī)格: 1g

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

 


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